Menjadi Bersama Komuniti Schizophyllum: Buat Budaya Steril Dari Jamur yang Ditemui: 3 Langkah (dengan Gambar)

2024 Pengarang: John Day | [email protected]. Diubah suai terakhir: 2024-01-30 11:12

Instruksional ini difokuskan pada menerangkan cara membuat budaya steril Schizophyllum Commune (nama umum cendawan Split Gill) pada piring petri menggunakan cendawan yang dijumpai. Schizophyllum Commune telah didapati mempunyai lebih dari 28, 000 jantina, dapat dijumpai di semua benua kecuali Antartika, dan mempunyai kemampuan (seperti "jamur busuk putih dan coklat" lain) untuk menurunkan pencemaran gangguan endokrin (plastik, hormon yang meniru petrokimia industri seperti baja Atrazine, pemplastik Bisphenol-A, atau hormon sintetik Diethylstilbestrol).

Saya akan membincangkan teknik pengenalan cendawan liar, cara membuat hidangan agar-agar nutrien, dan cara menggunakan cendawan yang terdapat untuk menanam budaya terpencil yang steril di dalam hidangan petri anda. Arahan lain dalam siri ini merangkumi teknik seperti pengenalpastian genetik cendawan, ujian enzimatik sederhana untuk menguji kemampuan cendawan memecah plastik dan pencemaran hormon yang meniru, dan cara membuat keju dengan S. Commune.

Projek ini keluar dari karya kolaborasi Mary Maggic, Paula Pin, dan saya sendiri semasa tinggal di HANGAR di Barcelona Sepanyol musim gugur 2018. Untuk maklumat lebih lanjut mengenai projek ini, baca ~~ atau lewati semua Bla Bla dan terus ke Langkah 1 untuk tutorial:)

Imej adalah dari Schizophyllum Commune Fanzine ~ fail boleh dimuat turun secara percuma di sini

Semasa menetap, tiga tujuan utama kami adalah:

1 ~ Teliti dan cernakan literatur ilmiah mengenai Schizophyllum Commune dan terdapat pelbagai interaksi dengan hormon dan pencemaran petrokimia endokrin. S. Commune adalah salah satu daripada banyak kulat "busuk putih dan coklat" dengan keupayaan untuk memecahkan pencemaran hormon dan endokrin yang mengganggu. Kulat ini memakan pokok dengan mengeluarkan enzim "lignoselulosa" dari badan jaringannya atau "mycelia" dan enzim mampu memecah selulosa dan lignin yang terbuat dari pokok. Kerana persamaan struktur antara selulosa, lignin, dan EDS '/ Hormon seperti Atrazine, BPA, Estradiol, Diethylstilbestrol, dan Nonylphenols, enzim "lignoselulosa" yang dirembeskan oleh kulat juga dapat memecah pelbagai jenis toksik. Selain itu, S. Commune menghasilkan polisakarida imunostimulasi yang bermanfaat sebagai pencegahan dan rawatan barah (Diluluskan di Jepun untuk rawatan barah serviks), dapat meningkatkan sifat phytestestrogenik tumbuhan tertentu melalui penapaian, dapat digunakan sebagai ganti rennet dan lactobacilius di proses pembuatan keju, dan menghasilkan enzim pelarut bekuan trombin (berguna dalam merawat trombosis). Anehnya, "beta-glukan" yang sama yang dapat diekstraksi dengan air mendidih sebagai rawatan barah dan imunostimulan, juga digunakan oleh industri petroleum untuk meningkatkan hasil minyak, mengikat S. Commune dalam gelung maklum balas bizar dengan pengeluaran gangguan endokrin petrokimia ia mampu merosot dan memperbaiki.

2 ~ Kembangkan protokol DIY dan DIWO (lakukan dengan yang lain) yang mempermudah resipi ini untuk bekerja dengan EDC dan kulat untuk menterjemahkan pengetahuan saintifik yang dikodifikasikan ke dalam bahasa yang lebih mudah diakses. Gunakan resipi ini untuk pendidikan, untuk disoal siasat, untuk menentang penjajahan molekul, dan membuat naratif baru mengenai pelbagai spesies dan mutagenesis kolektif kita.

3 ~ Mencabar wacana cisheteronormative dan queerphobic yang dominan mengenai bahan kimia gangguan endokrin (EDC). Untuk mengutip keilmuan Malin Ah-King dan Eva Hayward mengenai masalah tersebut, "Banyak gerai berita melaporkan kisah-kisah endokrin yang menakutkan ini dari halaman belakang kita. Dalam usaha untuk mendahului isu-isu ini - seperti yang akan kita jelaskan di media berikut ini telah menunjukkan metamorfosis Frankenstein. yang mengancam seks dan seksualiti. Daripada menangani banyak risiko kesihatan lain yang berkaitan dengan pendedahan toksik, masalah yang paling sensasi dan polemik menjadi perdebatan dan tindak balas kritikal. Ini menimbulkan persoalan: Mengapa seks lebih penting daripada kanser, penyakit auto-imun, dan bahkan kematian? Apa saraf budaya (banyak di antaranya diglobalisasi), yang dicetuskan? Dan, bagi kita yang mempunyai kebimbangan feminis, bagaimana kita melakukan reorientasi perbahasan dari esensialisme, seksisme, dan heteronormativiti? " (Seks Beracun).

Schizophyllum Commune adalah "kulat busuk putih" yang unik kerana didapati mempunyai lebih dari 28, 000 jenis kelamin genetik. Penyesuaian ini, banyak berteori, telah memungkinkan kepelbagaian genetik spesies ini yang luar biasa yang terdapat di setiap benua di seluruh dunia kecuali Antartika. Kami ingin meraikan banyaknya seks organisma ini sebagai salah satu contoh keanehan biologi. Wacana yang dominan di sekitar EDC di media, dan bahkan dari aktivis alam sekitar sangat menumpukan pada narasi yang tidak ilmiah, bahawa molekul ini menyebabkan seksualiti atau jantina tertentu yang masyarakat kita patologis, melabelkan non-normatif, dan sering berusaha untuk menghapuskan atau mengelakkan. Bukan sahaja fokus panik seks yang menjengkelkan, fobia, tentang kemarahan masyarakat mengenai saintifik EDC yang tidak realistik (hormon dan gangguan endokrin tidak membuat orang menjadi pelik atau trans) tetapi juga mengabaikan semua kesan buruk yang boleh kita kaitkan dengan EDC: kegemukan, gangguan tiroid, barah tertentu, antara lain risiko kesihatan.

Langkah 1: Cari Komuniti Schizophyllum di Komuniti Anda

Kultur steril kelas makmal Schizophyllum Commune boleh dibeli dengan harga sekitar $ 350 dari bank kultur mikrobiologi seperti ATCC … itulah sebabnya kami memilih untuk membiakkan cendawan liar secara percuma:)

Saya merasa senang kerana saya telah membaca mengenai Schizophyllum Commune dan kebetulan menyedari ia tumbuh di atas pokok di hadapan apartmen saya suatu hari. Sekiranya anda tidak begitu bernasib baik kerana terserempak dengan S. Commune di kawasan kejiranan anda, anda pasti ingin pergi ke kawasan berhutan untuk mencari cendawan "bracket" yang tumbuh di atas pokok kayu keras yang sakit (pokok-pokok yang kelihatannya tidak mereka lakukan terlalu baik) atau pokok tumbang. S. Commune adalah salah satu kulat yang paling biasa ada di seluruh dunia dan boleh didapati di mana sahaja terdapat kayu keras untuk ditanam.

Mushroomobserver.org memberikan penerangan terperinci yang hebat tentang di mana dan kapan anda kemungkinan akan menemui S. Commune, serta cara mengenal pasti dan bagaimana mengelakkan "kelihatan seperti" yang boleh menyebabkan salah pengenalan:

"IDENTIFIKASI: Komun Schizophyllum mudah dikenali dengan insang terbelahnya, rambut lebat, dan topi berbentuk kipas. Cap selebar 1-4.5cm dan biasanya berbentuk cangkang atau kipas dengan permukaan kelabu hingga keputihan. Basidiospora berukuran 5-7.5 × 2 -3 mikrometer. Cendawan sejenis yang dikenali sebagai "Crimped Gill" Plicaturopsis crispa tidak begitu banyak diedarkan.

HABITAT: Komun Schizophyllum tumbuh di atas kayu keras menggunakan enzim untuk menurunkan lignin dan menyebabkan "reput putih." Oleh itu, terdapat di kebanyakan kawasan berkayu. Ia dapat dijumpai sepanjang tahun kerana kemampuannya mengering, menghidrat semula dalam keadaan lebih baik, dan kemudian terus berputar.

Kulat ini boleh menjadi parasit pada pohon berdiameter kecil yang mengalami tekanan dari faktor lain, seperti kekeringan.

LIHAT ALIK: Plicaturopsis crispa atau "Crimped Gill" serupa dengan Split Gill. Ia juga mempunyai badan berbuah berbentuk shell / kipas. Bagaimanapun penutupnya berwarna coklat kemerahan atau coklat kuning, dan bahagian bawahnya sangat khas. Ia mempunyai urat berkerut seperti insang yang jauh berbeza daripada insang pecah Schizophyllum commune. Crimped Gill kurang biasa tetapi tersendiri apabila dijumpai."

Langkah 2: Buat Plat Agar Nutrien untuk S. Commune untuk Berkembang

Untuk mengasingkan budaya S. Commune, anda akan memerlukan beberapa piring petri yang dipenuhi dengan makanan untuk cendawan. Ekstrak malt Agar adalah makanan yang mudah dibuat untuk S. Commune, atau "nutrien media" yang boleh dibuat dengan bahan yang mudah diakses. Ia juga merupakan sumber makanan yang baik untuk digunakan semasa melakukan eksperimen ujian enzimatik dengan S. Commune dan jamur busuk putih atau coklat lain ~ proses ini akan diliputi dalam arahan lain.

CATATAN SISI: Sekiranya anda menghadapi masalah dalam mencari S. Commune, terdapat banyak kulat lain dalam keluarga yang sama yang dapat dikultur menggunakan proses yang sama dan sama baiknya jika tidak lebih baik dalam merendahkan pencemar yang mengganggu endokrin. Turkey Tail (Trametes Versicolor) telah ditemukan dalam banyak kajian yang melihat ratusan jamur busa putih dan coklat menjadi pengeluar enzim "lignoselulosa" tertinggi yang menurunkan pencemaran petrokimia. Cendawan tiram juga sangat bagus dalam hal ini.

Saya melakukan kerja mikrobiologi di makmal biologi komuniti yang dipanggil BUGSS (Ruang Sains Bawah Tanah Baltimore) di mana saya mempunyai akses kepada peralatan kaca, skala digital, silinder lulus, autoklaf (untuk pensterilan haba dan tekanan media), dan sebagainya. Makmal seperti ini mempunyai muncul di seluruh dunia dalam satu dekad yang lalu, jadi anda mungkin ingin menyemak senarai ini untuk melihat apakah ada yang berdekatan dengan anda. Sekiranya anda tidak mempunyai makmal komuniti yang hebat seperti ini di kawasan anda, anda harus melabur dalam beberapa peralatan asas untuk proses ini seperti:

1 ~ Skala digital untuk mengukur bahan anda dengan tepat

2 ~ Periuk tekanan untuk mensterilkan media anda dengan panas dan wap

3 ~ Piring Petri, boleh dibeli dalam talian dengan harga yang cukup murah, kaca yang boleh digunakan semula atau plastik sekali pakai akan berfungsi tetapi boleh digunakan semula selalu lebih baik:)

4 ~ Beberapa gelas untuk mencampurkan bahan-bahan anda, mensterilkan dan menyimpannya.

Sekiranya anda tidak mahu melabur dalam peralatan tersebut, anda boleh mendapatkan pinggan agar-agar ekstrak malt yang telah dicurahkan untuk dibeli di laman web seperti Amazon ~ ia akan lebih mahal dalam jangka masa panjang sekiranya anda merancang untuk terus melakukan kerja mikrobiologi.

Sudah ada banyak panduan hebat dan video youtube tentang cara membuat hidangan petri media nutrien anda sendiri di rumah. Oleh itu, daripada membahas secara terperinci mengenai perkara ini, saya hanya akan menghubungi pasangan - dan memberikan resipi 2% Malt Extract Agar, yang merupakan media nutrien yang akan anda gunakan.

Freshcap Musrooms: Panduan Cara Membuat Plat Agar untuk Menanam Cendawan di Rumah

Mykoweb: Bermula dengan Penanaman Cendawan

Lembaran Data Teknikal Agar Ekstrak Malt

2% Agar Ekstrak Malt (MEA) ~~ Resipi untuk 1 Liter:

Ekstrak Malt 20g (bekalan membuat bir biasa, boleh dibeli secara dalam talian)

15g Agar (agen pemejalan - ini digunakan untuk memasak dengan kerap sehingga boleh dibeli secara dalam talian atau di beberapa kedai runcit)

1 Liter H20 (Saya biasanya menggunakan air Reverse Osmosis yang boleh dibeli di kebanyakan kedai runcit di jag galon)

Resipi ini dapat diubahsuai dengan mudah jika anda ingin membuat kuantiti yang lebih kecil. Saya sering membuat hanya 250 mL pada satu masa misalnya, jadi saya akhirnya menggunakan 5 gram Malt Extract, 3.75 gram Agar, dan 250 mL air.

Langkah 3: Inovasikan Hidangan Petri Anda Dengan Kulat

Cendawan yang anda lihat disebut "badan berbuah", ia hanyalah sebahagian kecil dari organisma. Sebahagian besar badannya tersembunyi di pokok (atau di tanah), memakan kayu. Bahagian cendawan ini disebut miselium. Untuk membudayakan badan misil putih, tentacular, rhizomatic, misis putih Schizophyllum Commune ke piring petri, anda akan mengambil sampel batang, sterilkan, dan letakkan di piring MEA anda. Miselium akan tumbuh dari sampel inti batang cendawan yang disterilkan dan menjajah piring petri, kelihatan seperti tikar kapas putih.

Anda memerlukan:

• Plat Malt Extract Agar (MEA) yang anda sediakan pada langkah sebelumnya
• 70% alkohol Isopropil (alkohol gosok) dan botol semburan
• Tuala kertas
• Scalpel, atau hanya pisau cukur keluli tahan karat - pemotong kotak akan berfungsi
• pinset logam
• sarung tangan
• Api - Saya menggunakan lampu alcohaul untuk pensterilan instrumen, NonDisjunction mempunyai tutorial hebat bagaimana membuatnya di sini.
• Permukaan steril untuk dipotong (saya hanya menggunakan hidangan petri steril untuk ini)
• Parafilm, filem parafin yang digunakan untuk menutup piring petri - anda juga boleh menggunakan pita pelekat jika anda tidak mempunyai ini

TEKNIK STERILE:

Perkara utama yang ingin anda perhatikan ketika cuba menggunakan teknik steril ialah bakteria dan spora terus jatuh di udara, jadi anda mahu menyimpan piring petri anda sebanyak mungkin. Apabila anda mengangkat penutup untuk menuangkan media, atau menyuntik, sebaiknya tutup penutup tepat di atas pinggan, membolehkan anda memasuki bahagian dalam secara mendatar, tetapi tutup penutup di atas pinggan untuk mengelakkan bakteria masuk. Kedua, anda adalah konglomerat raksasa manusia, bakteria, kulat, dan organisma lain ~~ walaupun anda tidak dapat melihatnya, anda dikelilingi oleh awan mikroba yang lebat yang menyebar keluar dari badan anda. Daripada hanya duduk di permukaan kulit anda, mikro-bioma anda meluas ke udara ~~ sooooooo, jangan sekali-kali melambaikan tangan ke atas piring petri, atau bersandar di atas pinggan terbuka untuk melihat ke dalam. Dan pakai sarung tangan jika anda mempunyai mereka;)

SIAPKAN RUANG KERJA SEMI-STERILE ANDA

Pilih permukaan kerja yang tidak berpori daripada serpihan dan sampah. Semburkan kawasan ini dengan larutan Alkohol Isopropil 70% anda dan lap dengan tuala kertas. Letakkan api anda di tengah-tengah kawasan kerja anda dan nyalakan. Anda boleh bekerja sedekat mungkin dengan api kerana ia menghasilkan medan steril kecil di sekitarnya. Letakkan piring MEA anda ke satu sisi dan sampel cendawan anda ke permukaan pemotongan steril di sisi lain. Saya biasanya menggunakan piring petri yang steril sebagai permukaan pemotong steril saya dan juga alat rehat. Tuangkan sedikit alkohol Isopropil ke dalam gelas kecil - anda akan menggunakannya untuk mensterilkan pisau dan pinset semasa bekerja.

* ¡~ INOKULASI ~! *

Sebelum melakukan apa-apa, sterilkan pisau dan pinset anda dengan mencelupkannya ke dalam isopropil alch dan kemudian menahannya di atas api sebentar. Selepas pensterilan, letakkan di permukaan pemotong steril anda jika anda meletakkannya. Dengan menggunakan pinset, pegang batang cendawan pegun dan potong sedikit bahagian hujungnya. Ambil potongan ini dan potong semua sisi sehingga anda berakhir dengan kiub kecil inti batang cendawan dengan semua permukaan luarnya ditanggalkan. Ini membantu menyingkirkan semua mikroba lain yang hidup di cendawan sehingga tidak mencemarkan budaya anda. Kemudian celupkan inti batang ke dalam isopropil selama kira-kira 30 saat, tarik keluar, dan biarkan kering di dalam medan api yang steril (jangan gunakan api untuk mengeringkannya, ini akan membunuh cendawan). Api sterilkan pinset anda lagi semasa anda menunggu inti batangnya kering. Kemudian angkat penutup salah satu piring MEA anda dengan cukup untuk memasukkan pinset dari sisi, dan gunakan pinset yang disterilkan untuk meletakkan inti batang di tengah pinggan. Tutup pinggan dengan parafilm, dan selama beberapa minggu akan datang, anda akan melihat S. Commune miselium menjajah pinggan.

Saya biasanya membuat beberapa pinggan ketika bekerja dengan sampel liar sehingga jika saya mendapat pencemaran, saya cenderung mempunyai sekurang-kurangnya satu budaya bersih.